Yra tam tikri antriniai medžiagų apykaitos keliai, kuriuos gali paskatinti LIGHT arba TUMSA; čia, be terpės ir kultūros metodo, yra ir kitų veiksnių, turinčių įtakos antrinių metabolitų gamybai ląstelių kultūroje.
Šviesa gali teigiamai arba neigiamai paveikti tam tikrą kultūrą in vitro, panašiai kaip tai, kas vyksta gamtoje; todėl jo bus arba nebus, taip pat ir dėl gaminamo antrinio metabolito tipo.
Šviesą galima laikyti jungikliu, leidžiančiu įjungti arba išjungti tam tikrus medžiagų apykaitos kelius. Jis turi būti įvertintas ne tik pagal buvimą ar nebuvimą, bet ir pagal intensyvumą (šviesos kiekį), kokybę (bangos ilgius) ir fotoperiodą (šviesos ir tamsos valandos per 24 valandas).
Aeracija, tai yra ryšys tarp deguonies ir anglies dioksido, gali paskatinti ar slopinti veikliųjų medžiagų gamybą; todėl gerai žinoti, ar ląstelių išlaikymas anoksijoje teigiamai veikia galutinį biotechnologo tikslą.
Optimali in vitro kultūros temperatūra svyruoja tarp 25 ir 30 ° C; tačiau yra tinkamų išimčių. Bet kokiu atveju šiluminė variacija yra stresas, galintis tam tikru būdu kištis į antrinių metabolitų gamybą.
In vitro kultūroje pH dažnai kinta laikui bėgant, nes ląstelės nuolat anabolizuojasi ir katabolizuojasi; tačiau drastiškas jo kitimas gali dar kartą paveikti veikliųjų medžiagų gamybą; todėl jis turi būti nuolat stebimas naudojant chemostatą.
Iššaukimas yra biotechnologinis terminas, nurodantis pasėlius sukėlusį streso stimulą dviem būdais: biotiniu arba abiotiniu. Sukėlimas, ty streso sukėlimas, abiotinis atitinka fizinį stresą, pvz., UV spinduliuotę arba „sunkiųjų metalų naudojimą“. , nors biotinis sužadinimas atitinka in vitro stresą, kuris imituoja fitopatogenų agresiją gamtoje (saugokitės, kad ląstelė nesusirgtų). Todėl antrinių metabolitų gamyba reaguojant į patogeno ataką, kultūra dezinfekuojama autoklave, kad būtų sunaikinti nepageidaujami mikroorganizmai.
Visi šie veiksniai kartu su auginimo metodu ir skirtinga auginimo terpės sudėtimi leidžia pačiam pasėliui tinkamai augti ir gaminti antrinius metabolitus. Kiekvienai augalų rūšiai, auginamai in vitro, reikia individualiai optimizuoti visus šiuos veiksnius; tarp jų - ir hormonų buvimą auginimo terpėje. Biotechnologinėje srityje dažniausiai naudojami hormonai yra auksinai, giberelinai ir citokinai; etilenas nėra labai paplitęs. abscisinė rūgštis naudojama somatiniams embrionams generuoti. Šių hormoninių klasių buvimas ar nebuvimas, jų koncentracija ir kiekybiniai santykiai lemia augimą, o ne antrinių metabolitų gamybą ar kartais tam tikrą diferenciacijos lygį in vitro. Todėl, norint nukreipti ląsteles į nustatytą tikslą, būtina turėti hormoninių klasių.
Prieš pradedant biotechnologinį projektą, būtina nuodugniai žinoti visus medžiagų apykaitos kelius, prieš kuriuos gali priešintis ląstelių kultūra; taip pat todėl, kad šie keliai yra vienkrypčiai ir pereina nuo pirminio metabolizmo prie antrinio (niekada atvirkščiai, todėl pirminiai metabolitai yra antrinių metabolitų pirmtakai).
Kiti straipsniai tema „Biotechnologija: veiksniai, turintys įtakos veikliųjų medžiagų gamybai“
- Biotechnologijos: bioreaktorių tipai ir jų taikymas
- Farmakognozija
- Veiksniai, turintys įtakos kai kurių vaistų derliui